抑制 DBC2 基因启动子甲基化促进乳腺癌细胞凋亡的研究

Expression of DBC2 genein breastcancercellsand itseffecton cell proliferation and apoptosis

摘要:

研究抑癌基因 DBC2 在乳腺癌的表达与甲基化状态之间的联系，及其对乳腺癌细胞系T-47D 细胞增殖和凋亡的影响。方法 体外培养 3 种乳腺癌细胞株（T-47D、MCF-7、MDA-MB-23）和正常乳腺细胞株（MCF-10），检测 4 种细胞中 DBC2 基因的表达及其启动子区甲基化状况；5-Aza-CdR 处理T-47D 细胞后，检测 5-Aza-CdR 对 T-47D 细胞 DBC2 启动子甲基化状态和其表达的影响，并通过 MTT 和Annexin-V/PI 双染法分别检测处理前后 T-47D 细胞增殖和凋亡的变化。结果DBC 2 在 T-47D 细胞表达缺失，乳腺癌细胞DBC 2 启动子发生甲基化；5-Aza-CdR 成功逆转了 T-47D 细胞DBC 2 的甲基化状态，并使DBC2 mRNA 表达恢复（ <0.05）；不同浓度的 5-Aza-CdR 处理 T-47D 细胞后，T-47D 细胞增殖下降（ <0.05），凋亡率增加（ <0.05）。结论 DBC2 启动子甲基化导致 T-47D 细胞 DBC2 表达沉默，激活DBC2 表达可抑制 T-47D 细胞增殖并促进其凋亡。

Abstract:

To study the association between expression of DBC2 gene and itspromotermethylation,and the effect of DBC2 on the proliferation and apoptosis ofbreastcancer T-47D cells.M ethods Three breast cancercelllines(T-47D,MCF-7 and MDA-MB-23)and normalbreastcellline(MCF-10)were cultured ,the expression and promotermethylation status of DBC2 in the fourcelllines were measured.T-47D cells were treated by 5-Aza-CdR,and the effectof5-Aza-CdR on the DBC2 mRNA leveland promotermethylation status were detected.T-47D cellproliferation and apoptosis were determined by MTT and Annexin-V/PI respectively.Result DBC2 geneexpression wasnotobserved,whereas DBC2 promotermethylation wasfound in T-47D cells.5Aza-CdR reversed the methylation of DBC2 promoterand activated the expression of DBC2( < 0.05).The cell proliferation wassignificantly inhibited and the apoptosiswaspromoted in T-47D cellsaftertreatmentwith 5-Aza-CdR ( < 0.05). Conclusions The methylation of DBC2 promoter induces the silence of DBC2 mRNA. The activation of DBC2 geneexpression can inhibitthecellproliferation and promoteapoptosisofT-47D cell.