摘要
选取2019年1月—2021年9月新余市中医院收治的155例老年CHF患者为CHF组，另选取同期该院体检健康者57例为对照组，CHF组患者根据预后情况分为预后不良组（58例）和预后良好组（97例）。实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测miR-208a mRNA相对表达量；酶联免疫吸附试验（ELISA）检测CASP3、B型脑利钠肽（BNP）水平；采用Pearson/Spearman相关系数分析老年CHF患者血清miR-208a、CASP3与BNP、右心室内径（RVD）、左心室舒张末期内径（LVEDD）、左心室短轴缩短率（LVFS）、左室射血分数（LVEF）、左心室质量指数（LVMI）的相关性；多因素Logistic回归分析老年CHF患者预后不良的影响因素；绘制受试者工作特征（ROC）曲线分析血清miR-208a、CASP3对老年CHF患者预后不良的预测价值。
CHF组血清miR-208a、CASP3、BNP水平，LVMI高于对照组，RVD、LVEDD大于对照组，LVFS、LVEF低于对照组（P <0.05）。Pearson/Spearman相关性分析结果显示，老年CHF患者血清miR-208a、CASP3与BNP、RVD、LVEDD、LVMI呈正相关（r /rs =0.577、0.627、0.535、0.619和0.619、0.721、0.601、0.631，均P <0.05），与LVFS、LVEF呈负相关（r /rs =-0.555、-0.568和-0.655、-0.700，均P <0.05），血清miR-208a与CASP3呈正相关（rs =0.638，P <0.05）。多因素Logistic回归分析结果显示，NYHA ≥Ⅲ级［O^R=3.383（95％ CI：1.358，8.423）］、BNP［O^R=1.006（95% CI：1.002，1.009）］、LVMI［O^R=1.114（95% CI：1.005，1.233）］、miR-208a［O^R=1.203（95% CI：1.096，1.321）］、CASP3［O^R=1.196（95% CI：1.088，1.315）］为老年CHF患者预后不良的独立危险因素（P <0.05），LVEF［O^R=0.867（95％ CI：0.753，0.998）］为独立保护因素（P <0.05）。ROC曲线分析结果显示，血清miR-208a、CASP3单独及联合预测老年CHF患者预后不良的ROC曲线下面积（AUC）分别为0.785、0.783和0.867。
慢性心力衰竭（chronic heart failure, CHF）是心室功能不全引起的临床综合征，近年来随着人口老龄化加剧，老年CHF的患病率逐年上升，我国60岁以上人群心力衰竭发病率每年高达2 375/10万人，已成为老年人死亡、失能及医疗费用增加的主要原
选取2019年1月—2021年9月新余市中医院收治的155例老年CHF患者为CHF组，其中，男性104例，女性51例；年龄60～93岁，平均（71.07±6.96）岁；体质量指数17.99～27.18 kg/
老年CHF患者入院12 h内和健康体检者均采用美国GE Voluson E8彩色多普勒超声诊断仪行超声心动图检查，选择4 MHz频率，65/s帧频，参考《超声心动图评估心脏收缩和舒张功能临床应用指南
1.2.3 实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）和酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清miR-208a表达及CASP3、BNP水平 采集老年CHF患者入院次日静脉血3 mL，对照组于体检时采集，3 000 r/min离心15 min（半径15 cm），取上层血清，采用TRIzol法提取总RNA后逆转录为cDNA，按照SYB
TTGTTCCAGAGCCCAT-3'，反向引物：5'-ATGCTTG
TTCCAGAGCCCAT-3'；内参U6正向引物：5'-ATG
CTTGTTCCAGAGCCCAT-3'，反向引物：5'-ATG
CTTGTTCCAGAGCCCAT-3'。反应条件：95 ℃预变性90 s，95 ℃变性30 s，63 ℃退火30 s，72 ℃延伸15 s，循环40次后采用
两组血清miR-208a mRNA、CASP3、BNP、RVD、LVEDD、LVFS、LVEF、LVMI比较，差异有统计学意义（P <0.05），CHF组血清miR-208a mRNA、CASP3、BNP、RVD、LVEDD大于对照组，LVMI高于对照组，血清LVFS、LVEF低于对照组。见
| 组别 | n | miR-208a mRNA （x±s） | CASP3/[pg/mL， M（P25，P75）] | BNP/ [pg/mL， M（P25，P75）] | RVD/（mm， x±s） |
|---|---|---|---|---|---|
| CHF组 | 155 | 1.52±0.32 | 28.99（23.85，35.09） | 828.08（653.86，975.97） | 29.49±2.51 |
| 对照组 | 57 | 0.94±0.28 | 8.49（4.91，10.64） | 280.44（252.85，307.37） | 15.72±2.27 |
| t / U值 | 12.143 | 10.713 | 10.786 | 36.281 | |
| P 值 | 0.000 | 0.000 | 0.000 | 0.000 |
| 组别 | LVEDD/（mm， x±s） | LVFS/（％， x±s） | LVEF/（％， x±s） | LVMI/[g/ |
|---|---|---|---|---|
| CHF组 | 64.38±7.44 | 18.94±3.75 | 39.65±3.79 | 106.76（93.47，117.42） |
| 对照组 | 44.33±4.46 | 34.36±4.34 | 60.62±4.63 | 79.99（75.03，85.32） |
| t / U值 | 23.863 | 25.416 | 33.581 | 9.601 |
| P 值 | 0.000 | 0.000 | 0.000 | 0.000 |
Pearson/Spearman相关性分析结果显示，老年CHF患者血清miR-208a、CASP3与BNP、RVD、LVEDD、LVMI呈正相关（P <0.05），与LVFS、LVEF呈负相关（P <0.05）；血清miR-208a与CASP3呈正相关（P <0.05）。见
| 项目 | miR-208a | CASP3 | ||
|---|---|---|---|---|
| r/rs 值 | P 值 | rs 值 | P 值 | |
| BNP |
0.57 | 0.000 | 0.619 | 0.000 |
| RVD | 0.627 | 0.000 | 0.721 | 0.000 |
| LVEDD | 0.535 | 0.000 | 0.601 | 0.000 |
| LVFS | -0.555 | 0.000 | -0.655 | 0.000 |
| LVEF | -0.568 | 0.000 | -0.700 | 0.000 |
| LVMI |
0.61 | 0.000 | 0.631 | 0.000 |
| miR-208a | - | - | 0.638 | 0.000 |
| CASP3 |
0.63 | 0.000 | - | - |
注 ： †为Spearman相关性分析。
随访12个月，155例老年CHF患者再发心力衰竭入院47例，心源性死亡11例，预后不良发生率为37.42％（58/155）。两组病程、NYHA分级≥Ⅲ级、BNP、RVD、LVEDD、LVFS、LVEF、LVMI、miR-208a mRNA、CASP3比较，差异有统计学意义（P <0.05），与预后良好组比较，预后不良组病程更长，NYHA分级≥Ⅲ级、BNP、LVMI、miR-208a mRNA、CASP3更高，RVD、LVEDD更大，LVFS、LVEF更低（P <0.05）。见
| 组别 | n | 男/女/例 | 年龄/（岁，x±s） | 体质量指数/（kg/ | 病程/[年， M（P25，P75）] | 原发疾病 例（％） | NYHA分级≥Ⅲ级 例（％） | ||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 冠心病 | 扩张型心肌病 | 原发性高血压 | |||||||
| 预后不良组 | 58 | 38/20 | 71.88±7.82 | 22.23±1.70 | 16.00（10.75，21.00） | 27（46.55） | 10（17.24） | 21（36.21） | 36（62.07） |
| 预后良好组 | 97 | 66/31 | 70.59±6.39 | 22.68±2.00 | 13.00（10.00，18.00） | 41（42.27） | 20（20.62） | 36（37.11） | 31（31.96） |
|
| 0.105 | 1.119 | 1.427 | 2.130 | 0.374 | 13.409 | |||
| P 值 | 0.746 | 0.265 | 0.156 | 0.033 | 0.830 | 0.000 | |||
| 组别 | BNP/[pg/mL， M（P25，P75）] | RVD/（mm， x±s） | LVEDD/（mm， x±s） | LVFS/（％， x±s） | LVEF/（％， x±s） | LVMI/[g/ |
|---|---|---|---|---|---|---|
| 预后不良组 | 919.06（812.06，1 103.58） | 30.31±2.81 | 67.22±7.75 | 17.61±3.17 | 38.23±3.50 | 113.81（100.04，129.56） |
| 预后良好组 | 749.97（588.87，910.49） | 29.00±2.40 | 62.68±6.73 | 19.74±3.86 | 40.50±3.71 | 104.66（91.03，113.22） |
|
| 4.678 | 3.204 | 3.830 | 3.540 | 3.768 | 3.868 |
| P 值 | 0.000 | 0.002 | 0.000 | 0.001 | 0.000 | 0.000 |
| 组别 | 用药情况 例（％） | miR-208a mRNA（x±s） | CASP3/[pg/mL，M（P25，P75）] | ||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 硝酸酯 | 米力农 | β受体阻滞剂 | 洋地黄 | 血管紧张素转化酶抑制剂/血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂 | |||
| 预后不良组 | 58（100.00） | 27（46.55） | 33（56.90） | 58（100.00） | 34（58.62） | 1.73±0.27 | 35.09（27.48，38.82） |
| 预后良好组 | 97（100.00） | 44（45.36） | 49（50.52） | 96（98.97） | 62（63.92） | 1.40±0.28 | 26.36（20.92，32.82） |
|
| 0.021 | 0.593 | - | 0.432 | 7.075 | 5.892 | |
| P 值 | 0.885 | 0.441 | 1.000 | 0.511 | 0.000 | 0.000 | |
注 ： “-”为Fisher确切概率法。
老年CHF患者预后为因变量（良好=0，不良=1），以病程、NYHA分级≥Ⅲ级（<Ⅲ级=0，≥Ⅲ级=1）、BNP、RVD、LVEDD、LVFS、LVEF、LVMI、miR-208a mRNA、CASP3（均为实测值）为自变量，进行多因素Logistic回归分析，结果显示，NYHA分级≥Ⅲ级、BNP、LVMI、miR-208a mRNA、CASP3为老年CHF患者预后不良的独立危险因素，LVEF为独立保护因素（P <0.05）。见
| 自变量 | b | Sb | Wald | P 值 | O^R | 95％ CI | |
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 下限 | 上限 | ||||||
| 病程 | 0.010 | 0.064 | 0.024 | 0.877 | 1.010 | 0.891 | 1.144 |
| NYHA分级≥ Ⅲ级 | 1.219 | 0.465 | 6.855 | 0.009 | 3.383 | 1.358 | 8.423 |
| BNP | 0.006 | 0.002 | 11.453 | 0.001 | 1.006 | 1.002 | 1.009 |
| RVD | 0.230 | 0.154 | 2.227 | 0.136 | 1.259 | 0.930 | 1.703 |
| LVEDD | 0.032 | 0.021 | 2.276 | 0.131 | 1.032 | 0.990 | 1.076 |
| LVFS | -0.182 | 0.096 | 3.572 | 0.059 | 0.834 | 0.690 | 1.007 |
| LVEF | -0.143 | 0.072 | 3.955 | 0.047 | 0.867 | 0.753 | 0.998 |
| LVMI | 0.108 | 0.052 | 4.254 | 0.039 | 1.114 | 1.005 | 1.233 |
| miR-208a mRNA | 0.185 | 0.048 | 15.167 | 0.000 | 1.203 | 1.096 | 1.321 |
| CASP3 | 0.179 | 0.048 | 13.729 | 0.000 | 1.196 | 1.088 | 1.315 |
ROC曲线分析结果显示，miR-208a、CASP3单独及两者联合预测老年CHF患者预后不良的ROC曲线下面积（AUC）分别为0.785、0.783和0.867，两者联合预测的AUC更大（P <0.05）。见
| 因素 | 最佳截断值 | 约登指数 | AUC | 95％ CI | 敏感性/％ | 95％ CI | 特异性/％ | 95％ CI | |||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 下限 | 上限 | 下限 | 上限 | 下限 | 上限 | ||||||
| miR-208a mRNA | 1.38 | 0.409 | 0.785 | 0.712 | 0.847 | 91.38 | 0.810 | 0.971 | 49.48 | 0.392 | 0.598 |
| CASP3 | 34.73 pg/mL | 0.414 | 0.783 | 0.710 | 0.845 | 51.72 | 0.382 | 0.650 | 89.69 | 0.819 | 0.949 |
| 两者联合 | - | 0.543 | 0.867 | 0.803 | 0.916 | 86.21 | 0.747 | 0.939 | 68.04 | 0.578 | 0.771 |
图1 miR-208a、CASP3预测老年CHF患者预后不良的ROC曲线
CHF是大多数心血管疾病的最终结局，尽管近年来在心力衰竭治疗领域取得较大进展，但由于老年CHF患者多病共存，存在多种心血管疾病危险因素、多种综合征、多重用药、机体功能自然减退等特点，极易发展为重症CHF，病死率和再住院率仍然居高不
心室重构是CHF发生、发展及决定患者预后的关键因素，该过程涉及炎症反应、氧化应激、神经内分泌系统激活、心肌纤维化、心肌细胞凋亡等诸多机
细胞凋亡是程序性细胞死亡的高度调控形式，生理状态下细胞内存在存活与死亡途径，细胞受到特定信号后能激活死亡途径引起细胞主动死亡，心肌细胞凋亡后能阻断金属蛋白酶信号途径，促进受损心肌细胞纤维化，进而促进心室重
综上所述，老年CHF患者血清miR-208a、CASP3可能共同参与心室重构并影响预后，可作为老年CHF患者预后不良的辅助预测指标，且两者联合的预测价值更高。但本研究结果仍需多中心研究验证，并需进一步研究miR-208a、CASP3影响CHF心室重构和预后的机制。
参 考 文 献
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