摘要:

目的  研究孟鲁司特联合强的松对博莱霉素诱导的肺纤维化（PF）大鼠模型的干预作用。方法  将60只Wistar大鼠随机分成5组，即空白对照组、模型对照组、孟鲁司特（MK）组、强的松组及联合干预组。空白对照组以生理盐水0.2 ml注入气管内，其余4组以气管内滴注博莱霉素（5 mg/kg）建立PF模型。分别在造模后第7天和第28天5组各处死6只大鼠取材。采用苏木精-伊红和Masson染色法观察肺组织纤维化改变，酶联免疫吸附试验检测血清结缔生长因子（CTGF）、转化生长因子β1（TGF-β1）的水平，免疫组织化学法染色检测肺组织中CTGF和TGF-β1的表达水平。结果  联合干预组和模型对照组比较，第7天肺泡炎评分为（1.63±0.16）和（2.73±0.15），第28天肺间质纤维评分（1.66±0.10）和（2.76±0.13）分，差异有统计学意义（P <0.01）。第7天，各组肺组织TGF-β1表达水平均低于模型对照组，差异有统计学意义（P <0.05）。第28天，各组肺组织CTGF、TGF-β1表达水平均低于模型对照组，差异有统计学意义（P <0.01）。第7天、第28天血清中CTGF和TGF-β1水平均低于模型对照组，差异有统计学意义（P <0.01）。结论  MK联合强的松更能显著减轻大鼠肺组织肺泡炎及PF程度，其机制与降低血清及组织中CTGF和TGF-β1的表达水平相关。

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目的  探讨血管性痴呆（VD）大鼠海马中脑源性神经营养因子前体蛋白（pro-BDNF）、成熟脑源性神经营养因子（mBDNF）、截短型脑源性神经营养因子（BDNF）变化及与认知功能的关系。方法  健康雄性SD大鼠120只，6月龄，体重350 g左右，随机分为模型组和假手术组，模型组结扎双侧颈总动脉，假手术组除不结扎血管外余同模型组，模型组和假手术组大鼠随机分为2、4、8和12周4个时间，水迷宫实验筛选造模成功大鼠，免疫组织化学法和Western blot检测假手术组及造模成功的大鼠不同时间点海马中pro-BDNF、mBDNF、截短型BDNF变化。结果  术后各时间点模型组大鼠的潜伏期均较假手术组延长（P <0.05）。免疫组织化学法检测显示模型组大鼠海马神经元形态改变、数量减少、BDNF表达下降。术后模型组pro-BDNF、mBDNF、截短型BDNF较假手术组降低（P <0.05），pro-BDNF水平下降趋势较缓慢，截短型BDNF水平下降趋势在缺血早期变化显著，后期变化缓慢；mBDNF水平下降趋势在缺血早期变化不明显，后期变化显著。结论  慢性缺血VD大鼠海马区pro-BDNF、mBDNF、截短型BDNF均有改变，3者比例的改变可能与VD大鼠认知功能障碍有关。

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目的  研究霉酚酸酯和环孢素A对酵母聚糖（Zymosan A）诱导小鼠RAW264.7巨噬细胞模式识别受体Dectin-1、Toll样受体2（TLR2）表达及细胞因子肿瘤坏死因子-α（TNF-α）释放的影响。方法  体外培养RAW264.7巨噬细胞，分别给予不同浓度的霉酚酸酯、环孢素A预处理细胞24 h，再利用100μg/ml Zymosan A单独刺激细胞，逆转录聚合酶链反应和流式细胞术检测细胞Dectin-1、TLR2 mRNA和蛋白水平的变化，酶联免疫吸附试验检测上清液中TNF-α浓度的变化。结果  Zymosan A单独作用巨噬细胞Dectin-1、TLR2 mRNA和蛋白水平明显上调，TNF-α浓度升高（P <0.05）。Zymosan A作用于霉酚酸酯或环孢素A预处理24 h的巨噬细胞Dectin-1、TLR2 mRNA和蛋白水平较Zymosan A单独作用组明显下调，TNF-α分泌量减少（P <0.05）。结论  霉酚酸酯和环孢素A抑制巨噬细胞Dectin-1和TLR2的转录和翻译，并下调TNF-α的释放，降低机体对真菌病原体的清除能力，这可能是应用霉酚酸酯和环孢素A引起难控性真菌感染的机制之一。

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目的  探讨循环型microRNA-92a（miR-92a）在先天性巨结肠（HD）中的表达，以及通过上调尾侧型同源转录因子-2（CDX2）基因抑制肠神经干细胞（ENSCs）增殖的可能机制。方法  选取2013年1月-2015年12月在山东省临沂市沂水中心医院行先天性巨结肠根治术16例HD患儿的术前血清标本。实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测血清miR-92a mRNA的表达。提取孕15 d胎鼠肠管ENSCs，通过免疫学方法鉴定ENSCs；免疫磁珠法分选Nestin+ENSCs，脂质体转染使Nestin+ENSCs内过表达miR-92a，噻唑蓝法检测细胞的增殖活性，qRT-PCR、Western blot检测CDX2基因的表达。结果  HD患儿血清中miR-92a mRNA的相对表达量为（23.5±4.66），高于对照组（t =12.661，P =0.000）；ENSCs细胞培养早期Nestin染色阳性，具有向Tuj-1阳性、胶质纤维酸性蛋白阳性细胞分化的潜能；ENSCs过表达miR-92a后，CDX2 mRNA的相对表达为（13.024±3.882），高于对照组（F =47.212，P =0.000），CDX2蛋白表达为（0.436±0.0828），高于对照组（F =48.793，P =0.000），细胞的增殖活性在转染后24、48和72 h明显受抑制。结论  miR-92a通过上调CDX2基因的表达，抑制ENSCs的增殖，可能促进HD发生、发展。

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目的  检测结肠癌转移相关基因1（MACC1）蛋白在胃癌病变组织及癌旁正常组织中的表达，以及与胃癌各临床病理特征的关系，进一步分析MACC1与蛋白磷酸酶2A的癌性抑制因子（CIP2A）蛋白表达是否具有相关性，评估胃癌预后，并为治疗提供思路。方法  应用逆转录聚合酶链反应检测胃癌组织和癌旁正常组织中MACC1蛋白的表达，分析其表达差异性。免疫组织化学法测定30例胃癌组织和癌旁正常组织中MACC1和CIP2A蛋白的表达，分析MACC1蛋白与胃癌临床不同病理特征的关系，同时分析MACC1和CIP2A蛋白的相关性。结果  MACC1蛋白在癌旁正常组织和胃癌组织中的阳性表达率分别为16.7%和76.7%，差异有统计学意义。CIP2A蛋白在癌旁正常组织和胃癌组织中的阳性表达率分别为23.3%和73.3%，差异有统计学意义。不同性别、年龄、组织类型的MACC1蛋白阳性表达率比较，差异无统计学意义；不同组织分化程度、肿瘤侵润程度、淋巴结转移程度、临床分期的的MACC1蛋白阳性表达率比较，差异有统计学意义；MACC1与CIP2A蛋白表达呈正相关。结论  MACC1与CIP2A蛋白呈正相关，两者联合检测可以判断患者的预后。

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目的  探究在子宫颈癌发病过程中与纤维蛋白原（Fg）β448 G/A基因多态性的相关性。方法  采用聚合酶链反应-限制性片断长度多态性分析的方法对2013年5月-2014年12月初次就诊的汉族子宫颈癌患者141例标本与同期收集的健康汉族女性体检者141例标本的Fgβ448 G/A基因多态性进行基因型分型检测，并对检测结果进行统计分析。结果  ①病例组Fgβ448 G/A基因型频率及等位基因频率与对照组比较，病例组高于对照组（P <0.05）；②A等位基因与子宫颈癌的发生密切相关，③子宫颈癌GG、GA及AA基因型的血浆Fg水平分别是（3.09±0.22）、（3.11±0.26）和（3.31±0.51）g/L，差异无统计学意义（P >0.05）。结论  Fgβ448 G/A基因多态性变化与宫颈癌的发生可能具有相关性。

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目的  基于基因间隔序列（ITS）序列对灵芝进行分类。方法  培养灵芝、提取DNA、优化聚合酶链反应（PCR）体系、纯化与克隆、测序、构建遗传进化树、进行遗传分析。结果  经过一系列的梯度实验得知优化的PCR体系为25μl反应混合物中含模板DNA 25 ng、Mg2+为2.0 mmol/L、dNTPs 200μmol/L、Taq 1.5 U、引物为20 pmol；最佳反应程序为93℃预变性4 min，93℃变性40 s，59℃退火40 s，72℃延伸1 min，共35个循环，72℃继续延伸7 min，4℃无限循环。所采用的HZ002、DZ003、NZ004和XC005在遗传进化树上面十分接近，说明其可以划分为同一菌属，同属于灵芝菌属。结论  基于ITS序列对灵芝进行分类，与其他的分子标记技术所取得的分类结果一致，证实依据ITS序列来对真菌菌属进行分类是十分合理的。

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目的  评价通过数字减影血管造影（DSA）获取的半定量血流灌注参数评估进展期原发性肝细胞癌肝动脉化疗栓塞（TACE）短期疗效的能力。方法  34例经实验室和影像学资料证实的进展期肝细胞癌患者共53个病灶进行TACE，TACE前经肝固有动脉行DSA灌注成像，获得医学数字成像和通信标准（DICOM）原始图像后，导入自主研发的后处理软件Analysis 1.0进行后处理，生成各区域感兴趣区（ROI）的时间－密度曲线（TDC）并获取瘤灶DSA灌注半定量参数包括视频密度增量峰值（△PV）、达峰时间（TP）、显影持续时间（TD）、TDC升支（KmaxU）及降支最大斜率（KmaxU）。对比患者术前及术后3～5个月的CT资料，根据实体肿瘤RESIST标准将肿瘤分为治疗反应组和无反应组，采用t检验对比两组患者间DSA血流动力学灌注参数的差异。对有统计学意义的值进行受试者工作特征曲线（ROC）分析。结果  反应组的TD明显高于无反应组（均数分别为12.26和9.86；P =0.002）。根据TD绘制ROC曲线，曲线下面积（AUC）为0.728。当临界值TD=11 s时，TD预测判断TACE治疗反应的敏感性为63.9%，特异性为82.4%。TD阳性预测值为88.5%，阴性预测值为51.9%。结论  半定量DSA灌注成像可用于预测进展期肝细胞癌TACE短期治疗疗效。治疗前较高的TD值提示TACE治疗短期疗效较好。

摘要:

目的  探讨蛋白激酶基因突变与癌症发生的关系。方法  本研究通过搜索癌基因组数据库，获得人类全部514个蛋白激酶基因在不同癌基因组中的变异频率及表达变化。结果  基因表达搜索结果显示，绝大多数基因的表达上调。基因变异搜索结果显示，512个成员发生变异，变异频率最高为90%。其中，基因扩增频率要高于突变频率和删除频率，且删除频率最低。12个成员的突变频率>30%，功能研究相关的文献资料显示，其中的8个成员可能与癌症产生密切相关。结论  笔者推测高频突变的蛋白激酶基因可能具有重要功能，其很可能是癌基因或者抑癌基因。本研究结果为进一步深入研究相关蛋白激酶基因的功能，尤其是功能未知的成员，及其与癌症发生的关系提供重要参考。

摘要:

目的  评价格林模式健康教育（PRECEDE）对2型糖尿病（T2DM）患者糖化血红蛋白、血压、脂肪及体重指数（BMI）的变化及其控制的影响。方法  选取2010年1月-2010年12月在该院就诊的604例T2DM患者纳入本研究。将患者随机分为PRECEDE健康教育（PHPE）组和常规健康促进教育（CHPE）组，并对患者进行2年的随访。主要临床终点为24个月后随访患者糖化血红蛋白、脂肪水平、血压及BMI。结果  PHPE组患者糖化血红蛋白和收缩压（SBP）明显降低。PHPE组患者舒张压、三酰甘油及低密度脂蛋白胆固醇水平下降，但是与CHPE组比较，差异无统计学意义。两组患者随访期间BMI无明显改善。结论  PHPE是T2DM患者综合诊治的有效方法，有助于降低糖化血红蛋白和SBP水平，增加高密度脂蛋白胆固醇。